Tipuri de Acizi RiboNucleici
In celulele diferitelor organisme au fost evidentiate trei tipuri de acizi ribonucleici: mesager [ARN-m], solubil (de transfer) [ARN-s] si ribozomal [ARN-r].
ARN - m este sintetizat in timpul transcriptiei mesajului genetic (procesul de transcriere a informatiei genetice continuta de catena de ADN intr-o secventa complementara de ARN - m) si serveste ca tipar pentru sinteza proteinelor. Pe langa faptul ca ARN - m preia informatia genetica de la ADN are si rolul de a transmite aceasta informatie prin translatie organitelor citoplasmice (ribozomi) cu rol in sinteza proteinelor.
La ribovirusuri exista un alt tip de acid ribonucleic si anume ARN viral care are acelasi rol biologic cu ADN celular sau viral.
Acidul ribonucleic MESAGER
E. W o l k i n si L. A s t r a h a n (1958) au descoperit primii existenta unui acid ribonucleic de un tip special, denumit mesager. Cercetarile lor efec¬tuate la Eschichia coli au pus in evidenta ca acest A R N-m are caracte¬ristici proprii, astfel ca el poate fi diferentiat de alte fractii de A R N. Pentru punerea in evidenta a A R N-m s-a facut urmatoarea experienta bacterii de E. coil au fost infectate cu un bacteriofag, jar dupa doua minute au fost trecute pe un mediu cu fosfor radioacfiv (P32). Dupa trei minute bacteriile sunt spalate de mediul radioactiv si apoi se realizeaza un extract bacterian, care este supus actiunti dezoxiribotiucleazei ce hidrolizeaza A D N. Extra¬sul bacterian este centrifugat in gradient de densilate cu o solutie de zaha¬roza si in prezenta ionilor de magneziu (Mg++) in concentratie de 10 -4 M. In tubul centrifugei se obtin astfel mai multe straluri continind A R N ce au viteze de sedimentare diferite, care sunt separate prin gaurirea fundului tubului si recoltarea continutului picatura cu picatura, numerotindu-se pi¬caturile. Primele sunt recuperate straturile cu viteza de sedimentare mai mare. La fiecare strat in parte se masoara densitatea optica in U.V. cu lun¬gimea de unda de 2 600 A, pentru a obtine concentratia in acizi nucleici, si totodata se masoara radioactivitatea.
Studiul in U.V. al densitatii optice aratp existenta a doua maxime cores¬punzatoare vitezelor de sedimentare 50 S si 30 S, caracteristice particulelor ribozomlale bogate in A R N. Aceste straturi prezinta o tadioactivitate re¬dusa.
Masurarea radioactivitatii diferitelor straturi arata ca maximul se reali¬zeaza pentru stratul 20 S. A R N corespunzator acestei viteze de sedimen¬tare
reprezinta numai o mica fractie din cantitatea totala de A R N, sinte¬tizata in timp scurt in prezenta P32. Prin hidroliza usoara a acestei fractii si examenul sau cromatografic, s-a constatat ca A R N ce contine nucleo¬tide radioactive are o compozitie in baze similara cu A D N, dar in care timina esle inlocuita de uracil.
Acest fenomen poate fi evidentiat si prin realizarea unor hibrizi moleculari A D N - A R N - m, prin separarea in gradient cu clorura de cesium. S-a observat ca 40 - 60% din A R N-m par¬ticipa la formarea hibridului molecular respectiv.
